目的：调查临床护士在抗菌药物管理（AMS）中的知识、态度与实践现状，分析影响知识向实践转化的关键因素，为制定临床可行的能力提升方案提供依据。方法：采用横断面调查设计，于 2024 年 8 月至 12 月便利抽取 4 家三级甲等医院的 1262 名临床护士。使用一般资料问卷和护士 AMS 知信行量表收集数据。采用 SPSS 26.0 进行描述性统计、单因素分析和多元线性回归；运用 AMOS 24.0 构建结构方程模型分析变量间路径关系。结果：护士 AMS 知信行总分为（3.53±0.54），知识（3.73±0.58）、态度（3.48±0.51）、行为（3.39±0.52），各维度得分依次递减。经多元回归分析显示，培训次数（β=0.412, P<0.001）、协同查房频率（β=0.187, P=0.010）与工作年限（β=0.152, P<0.001）是行为的主要预测因素。结构方程模型证实态度在知-行间起部分中介作用（效应占比 38.7%）。结论：临床护士 AMS 实践水平有提升空间，其“知行差距”受知识应用能力、工作情境与系统支持等多因素影响。建议临床管理者从明确护士在 AMS 中的角色定位、开展针对性分层培训、优化多学科协作流程三方面着手，系统提升护士的 AMS 实践贡献。